髪の毛を2つに結ぶだけという簡単さから、少なくとも18世紀のヨーロッパではすでに存在していた髪型といわれています。それより古くにも似たような髪型をするものはいたほか、19世紀のアメリカの大学のアメフトの試合のチアリーダーの髪型もツインテールが多かったそうです。日本では1960年代に手塚治虫などがすでに特徴的に描いており、それ以降も漫画やアニメでちらほら登場の場を広げていました。1980年代には、ひみつのアッコちゃんやDr.スランプ アラレちゃんなど「幼女のあどけなさ」を演出する髪型として地位を確立しました。

星川リリィとは、アニメ『ゾンビランドサガ』の登場人物で、ゾンビィ6号、フランシュシュの最年少メンバーです。生前は全チャンネルのゴールデン番組で主演を経験したという伝説の天才子役という設定です。水色の髪のツインテールで頭頂部に大きな星型の髪飾りをしており、ライトブラウンの瞳が特徴です。

神崎アオイは、漫画『鬼滅の刃』の登場人物の一人で、古来より人食い鬼を退治してきた組織『鬼殺隊』の隊士です。鬼殺隊の最上級隊士である“柱”の一人である胡蝶しのぶの住む蝶屋敷で、鬼との戦いで負傷した隊士たちの治療や、そこから復帰するためのリハビリにあたる機能回復訓練の指揮を執っています。

市ヶ谷有咲は、『BanG Dream!』の登場人物で、性格は人見知り・面倒くさがり屋で、その体型やツインテールという女の子らしい容姿に反すような男勝りな口調と毒舌の持ち主です。

大野あやとは、アニメ『ガールズ&パンツァー』の登場キャラクターで、Dチーム(ウサギさんチーム)に所属しています。チーム唯一のツインテール&眼鏡っ娘です。

ニンフは、水無月すう著の漫画『そらのおとしもの』の登場人物で、名前の由来はギリシア神話の「ニンフ」からきています。イカロスに次いでシナプスから地上に降りた第2のエンジェロイドで、妖精のような羽と青い髪をツインテールでまとめた小柄な美少女です。

｢上野さんは不器用｣の主人公にしてメインヒロインです。とある中学校の科学部の部長で３年生の女子生徒で、現代科学を軽く超越したオーバーテクノロジーレベルの発明品を毎回のように開発するなど、驚異的な頭脳の持ち主です。普段は強気で尊大な口調と態度を見えますが、一方で恋する乙女な一面もあり、ギャップに惹かれるファンも多くいます。

吉川ちなつとは、『ゆるゆり』の登場キャラで、ボリュームのある桃色の髪を赤い雪洞でツインテールにしているのが特徴です。作中の中で一番女子らしい女子に描かれています。

王胡蝶は、『寄宿学校のジュリエット』の登場人物で、双子の妹の王手李亞とともに飛び級生、黒犬寮の監督生です。漫画のツインテールキャラのほとんどは金髪、銀髪、青髪などカラーがありますが、珍しく黒髪の正統派ツインテールです。

松嶋みちるとは、ゲーム『グリザイアシリーズ』の登場人物で、ある意味でメインヒロインです。なぜかツンデレキャラを演じている嘘ツンデレで、何かと口やかましく突っかかってきます。髪型はツンデレ＝金髪ツインテールという思い込みから染めているもので地毛は黒のようです。

アンチョビとは、アニメ『ガールズ&パンツァー』の登場キャラクターで、衰退していたアンツィオの戦車道を再建するために愛知県の学校からスカウトされ、履修者数が僅か数名しか残っていなかった状態から現在のチームを作り上げた過去を持つ作中屈指の苦労人です。黒リボンで結んだドリルツインテールが特徴です。

宮内れんげは、『のんのんびより』の登場人物で、通称「れんちょん」です。薄い色の紫髪をツインテールにしており、目は赤色の設定で、頭に双葉のようなアホ毛があるが、彼女のそれは毛と言うよりは房レベルの巨大なもので、遠目に見ると頭から噴水が出ているように見えます。

小路綾は、『きんいろモザイク』の登場人物で、黒髪（青みがかった黒髪として描かれている）をツインテールにしているのが特徴のかわいい人気キャラです。しっかり者であるが、登校の際にタイツを履き忘れたりなど、おっちょこちょいで乙女チックな面も持っています。

ソーニャは、『キルミーベイベー』の登場人物にして、主人公の一人です。女子高生にして殺し屋の設定で、外国出身で、金髪碧眼のツインテールが特徴の人気キャラです。

アリス・カータレットは、『きんいろモザイク』の主人公の一人で、英国出身の少女で、金髪をピッグテール（小束の二つ結び）に結んで、簪を挿しているのが特徴です。

松岡美羽とは、『苺ましまろ』の登場人物で、ツインテールが特徴です。トラブルメーカーで何かとトラブルを起こしては周りから怒られるキャラで、何かやらかした後はうつ伏せで倒れているのがお約束です。

恵飛須沢胡桃は、『がっこうぐらし!』の登場人物で、濃紺色の髪を赤いリボンでツインテールにしているキャラで、赤紫色の瞳と八重歯が特徴です。

ネフレン・ルク・インサニアは、ライトノベル『終末なにしてますか?忙しいですか?救ってもらっていいですか?』に登場する妖精です。判で押したような無表情で、滅多に感情を表に出さず口数も少ないキャラですが、ツインテールが似合っていてかわいいと人気です。

日向夏帆は、『ブレンド・S』の登場人物です。金髪ツインテールというツンデレの王道を素で行く見た目だが性格はむしろ明るく、仕事に慣れていない苺香の心配をするなど優しい面もあり、かわいさはもちろん、その優しさも人気の理由になっています。

りなとは「ケムリクサ」の登場人物の一人にして本作のキャラクターの一人で、パッツン前髪にツインテール、近未来的な世界観に似つかわしくない派手なメイド風の衣装が特徴の、かわいい人気キャラです。

凸守早苗は、アニメ『中二病でも恋がしたい!』の登場人物で、小鳥遊六花の唯一無二のサーヴァントにして、ミョルニルハンマーの使い手です。地面に届く程の長いツインテールが特徴で、先端を錘のようにしており、それを振り回して「ハンマー」としています。